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中国福彩网山西站 www.dfpifn.com.cn 首次將多對TaqMan探針的assay和ddPCR結合使用,實現了對腫瘤浸潤性T淋巴細胞的分類。方法學上也證實了ddPCR與多重PCR結合使用的可行性。

表期刊:Sci Transl Med 5, 214ra169 (2013) 作者:Harlan S. Robins, Nolan G. Ericson, Jamie Guenthoer, Kathy C. O’Briant, Muneesh Tewari, Charles W. Drescher, Jason H. Bielas;

文章摘要:

來自Fred Hutchinson癌癥研究中心的研究人員利用ddPCR技術,首次對一種特殊的腫瘤攻擊性免疫細胞進行了定量。

腫瘤浸潤性T淋巴細胞(Infiltrating T lymphocyte),常常發現于惡性腫瘤中,并參與了宿主的免疫應答。多個獨立的研究已經證明了腫瘤浸潤性淋巴細胞(tumor-infiltrating lymphocytes, TILs)的存在及其數量與生存率密切相關。但是由于方法學的限制,當前對TILs的檢測最多只能進行半定量。因此,不能利用TILs來進行臨床決策。

鑒于TILs的重要性,特別是考慮到其對癌癥預測的潛在效用以及它們在免疫應答中的作用,Fred Hutchinson癌癥研究中心的研究人員利用QX100系統開發了一種基于微滴式數字PCR的“QuanTILfy”檢測。由于適應性免疫細胞具有分子標簽,而且T細胞在其T細胞受體(T cell receptor, TCR)基因位點進行基因重排,這使得對TILs的定量成為可能?!癚uanTILfy”檢測可對組織中(包括腫瘤)的TILs進行定量,并對T細胞的克隆性進行評估。而且,研究人員還開發了一種分型系統來對“克隆性”進行分級,“克隆性”或許是藥物靶點的一個標記物。

在本研究中,Fred Hutchinson研究人員對30名卵巢癌患者的原發性腫瘤進行了QuanTILfy測定,這些患者已知生存預后在1-122個月之間。相比于生存期不到2年的患者,生存期超過5年的患者TILs出現率大約高3倍。這些結果表明,高水平TILs與患者生存呈正相關,支持了這一假說:TILs發揮了抑制腫瘤形成的作用。

QuanTILfy檢測被證實精確性和靈敏度極佳。在血液和正常人肺成纖維細胞純化出的人類T細胞的混合物中,這一檢測能夠在10,000個腫瘤細胞中檢測到一次TCR重排。重要的是,它也證實了ddPCR技術能夠通過多重檢測在一次反應中同時定量大量的標記物。

在對該項目的領導Jason Bielas(Fred Hutchinson癌癥研究中心公共健康科學部準會員)進行采訪時,Bielas表示“現在我們具備了在腫瘤細胞中實現重現性計數TILs的能力,我們或許能夠基于腫瘤TILs計數將患者進行分級,尤其是采用免疫療法給予更有效的治療?!?/span>

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